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>分子生物学实验指导

郜金荣

 

特色与简介:

本书是郜金荣编写由武汉大学出版社于20079月出版。

全书分为两大部分,第一部分简明介绍了分子生物学的一些基础理论知识,通过对该部分的学习,使学生对分子生物学基本实验知识有一定概括的了解;第二部分选编了34个学生实验,包括感受态细菌的制备与转化、各种载体DNA的提取及制备、目的基因RNA的制备和检测、DNA重组、基因组DNA的分离提取、PCR基因扩增、在原核细胞中表达真核基因、基因突变及检测、蛋白质印迹、Southern杂交、定点突变、基因表达调控的分析检测等内容。每个实验的后面都有思考题,还有背景资料,关键参数等资料。特别是编写了三个开放实验,如:设计一、  克隆并鉴定一个真核单拷贝基因;设计二、  在原核中克隆表达并纯化一个真核基因产物;设计三、  现有犯罪现场罪犯的血迹和三个犯罪嫌疑人的血样,请用分子生物学手段确定罪犯。等,让学生在老师的指导下自己设计一套实验,使学生有机会将所学的分子生物学基础理论知识运用到分子生物学实验的实践中。

本书主要适用于生物技术专业以及药学类专业的高年级本科生和低年级研究生,同时还可供从事分子生物学研究及其相关专业人员参考。

本书也存在一些错别字,如第一页倒数第4行的“可共选择的遗传标记”中的“共”应改为“供”;第六页第15行“TB超级肉培养基”应为“TB超级肉汤培养基”等。

目录

第一部分  分子生物学常用材料的基本知识

  第一章  大肠杆菌、质粒和噬菌体

    第一节  大肠杆菌

    第二节  质粒和噬菌体

  第二章  工具酶

    第一节  限制性内切核酸酶

    第二节  限制性作图

    第三节  用于修饰与放射性标记核酸的酶

    第四节  重组DNA分子的构建 

第二部分  学生实验

  实验一  质粒DNA的制备

  实验二  质粒DNA的电泳检查

  实验三  感受态细菌的制备及转化

  实验四  入噬菌体的制备

  实验五  DNA的制备

  实验六  单个M13噬菌体的分离

  实验七  M13噬菌体载体中制备单链噬菌体DNA

  实验八  M13噬菌体双链复制型DNA的制备

  实验九  哺乳动物基因组DNA的制备(哺乳动物血液DNA的制备)

  实验十  植物基因组DNA的制备

  实验十一  细菌基因组DNA的制备(小量制备细菌基因组DNA)

  实验十二  基因组DNA的电泳分析

  实验十三  组织培养细胞质RNA的制备(一步法从培养细胞或组织中分离RNA)

  实验十四  植物RNA的制备(植物RNA的制备(酚/SDS))

  实验十五  细菌RNA的制备

  实验十六  带有poly(A)RNA的制备

  实验十七  DNA的限制性内切核酸酶酶切分析

  实验十八  PCR扩增DNA中的引物设计

  实验十九  PCR扩增DNA中的模板的制备

  实验二十  PCR扩增DNA的基本反应

  实验二十一  限制性内切核酸酶部分消化法作物理图谱

  实验二十二  DNA酶切片段的回收

  实验二十三  DNA体外重组

  实验二十四  Southern吸印(核酸杂交技术)

  实验二十五  Northern杂交

  实验二十六  SDSPAGE

  实验二十七  Western吸印(蛋白质的免疫印迹技术)

  实验二十八  哺乳动物细胞核或细胞质内蛋白的提取

  实验二十九  用凝胶电泳进行迁移率改变试验检测:DNA结合

  实验三十  甲基化和尿嘧啶干扰反应分析蛋白质DNA的作用

  实验三十一  DNase I足迹法分析蛋白DNA结合位点 

开放实验  学生自己设计一套实验

  设计  克隆并鉴定一个真核单拷贝基因

  设计二  在原核中克隆表达并纯化一个真核基因产物

  设计三  现有犯罪现场罪犯的血迹和三个犯罪嫌疑人的血样,请用分子生物学手段确定罪犯

附录A  聚丙烯酰胺凝胶的配制

附录B  分子克隆中使用的试剂与缓冲液的配制